<li id="4aik8"></li> 蛋白質(zhì)電泳常用試劑配制方法如下：
一、3×SDS-PAGE loading buffer的配制
| 3×SDS-PAGE loading buffer | 10ml |
| 1M Tris-Hcl (PH 6.8) | 1.5ml |
| SDS | 0.6g |
| BPB(溴酚藍(lán)) | 30mg |
| 甘油（丙三醇） | 3ml |
| 去離子水 | 5.5ml |
1、將除BPB以外的藥品溶解。SDS常溫下很難溶解，可以在37℃水浴溶解。溶解后，再加入BPB，進(jìn)行溶解；
2、把溶好的buffer分裝到1.5ml的離心管中，1ml/管，常溫放置；
3、使用前，每管加入30µL巰基乙醇。
注意事項：巰基乙醇為危險品，加入的過程在通風(fēng)櫥中完成，并且?guī)Ш檬痔住?/p>
二、10×PBS的配制
| 0.1M PBS（10×PBS） | 1L |
| NaH2PO4.2H2O | 2.83g |
| Nacl | 85g |
| Na2HPO4.12H2O | 28.98g |
1、用去離子水將以上藥品進(jìn)行溶解；（溶解的非常慢，可能需要過夜）
2、調(diào)PH值到7.2，用0.4µm的濾膜過濾。常溫保存；
3、工作時用的是1×PBS。
三、1.5M Tris-Hcl (PH 8.8) 的配制
| 1.5M Tris-Hcl | 250ml |
| Tris | 45.425g |
1、用200ml去離子水將Tris溶解。
2、用濃鹽酸調(diào)PH值到8.8。
3、調(diào)好PH的Tris-Hcl定容到250ml。
4、0.4µm的濾膜過濾，常溫保存。
注意事項：Tris的緩沖能力很強(qiáng)，調(diào)PH值時，費些時間，但不要調(diào)過。
四、1M Tris-Hcl (PH 6.8) 的配制
| 1M Tris-Hcl | 250ml |
| Tris | 30.275g |
1、用200ml去離子水將Tris溶解；
2、用濃鹽酸調(diào)PH值到6.8；
3、調(diào)好PH的Tris-Hcl定容到250ml；
4、0.4µm的濾膜過濾，常溫保存。
五、30%丙烯酰胺的配制
| 30%丙烯酰胺 | 250ml |
| 丙烯酰胺 | 72.5 ml |
| BIS甲叉丙烯酰胺 | 2.5 ml |
1、把藥品用去離子水溶解后定容到250ml；
2、用濾紙過濾，放在棕色瓶子中，4℃保存。
注意事項：兩種藥品有毒性，配制過程要帶手套和口罩。
六、10%SDS的配制
1．1g SDS加入10ml去離子水進(jìn)行溶解；
2．分裝到1.5ml離心管中，-20℃保存。
七、10%過硫酸銨的配制
1．1g 過硫酸銨加入10ml去離子水進(jìn)行溶解。
2．分裝到1.5ml離心管中，-20℃保存。
八、5×SDS-PAGE電泳緩沖液的配制
| 5×SDS-PAGE電泳緩沖液 | 1L |
| Tris | 15.1g |
| Glycine（甘氨酸） | 94g |
| SDS | 5g |
將以上藥品用去離子水溶解后定容到1L，常溫保存。工作時用的是1×SDS-PAGE電泳緩沖液。
九、考馬斯亮藍(lán)R-250染色液的配制
1、往1g考馬斯亮藍(lán)R-250中加入250ml異丙醇，在磁力攪拌器上攪拌六小時以上；
2、加入650ml去離子水，磁力攪拌器攪拌過夜；
3、再加入100ml冰醋酸進(jìn)行溶解，磁力攪拌器攪拌；
4、在通風(fēng)櫥內(nèi)用濾紙進(jìn)行過濾。常溫保存。染色液只能反復(fù)用兩次。
注意事項：在磁力攪拌器上攪拌時，要把容器封口。
十、脫色液的配制
| 脫色液 | 1L |
| 醋酸（冰乙酸） | 100ml |
| 乙醇（無水乙醇） | 50ml |
| 去離子水 | 850ml |
常溫保存。
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