生物樣本是醫(yī)學(xué)研究的重要資源，其質(zhì)量在很大程度上決定著臨床結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。目前生物樣本及其提取產(chǎn)物主要有深低溫和常溫兩大類保存方式，針對不同科研的需求，更多的樣本保存方式也相繼問世，本文將對常用的樣本保存方式及運(yùn)輸條件進(jìn)行小結(jié)，可以收藏保存?zhèn)溆谩?/span>
樣本儲(chǔ)存條件
1. -196℃、-150℃ 深低溫凍存
超低溫凍存是理想的樣本保存方法，目前液氮（-196℃）是靠譜的樣本保存方法，然而由于樣本浸沒在液氮中，游離的組織碎片可能帶來交叉污染的潛在風(fēng)險(xiǎn)，因此催生了氣相液氮（-150℃）的保存方式，就是將樣本置于液氮以上、氣相液氮的包圍之中，可以很好地避免交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。另外，也可以通過電力冰箱制冷達(dá)到-150℃的低溫效果，從而能滿足樣本的長期保存需求。因?yàn)?137℃是水玻璃化溫度，低于此溫度時(shí)細(xì)胞內(nèi)能導(dǎo)致內(nèi)容物降解的一切生化反應(yīng)均處于失活狀態(tài)，從而能達(dá)到長期保存的要求。
2. -80℃
-80度低溫保存是凍存核酸較為理想的樣本保存方法：在不具有液氮保存條件的生物樣本庫，也可以考慮使用-80℃深低溫冰箱來保存組織樣本。有研究表明，在-80℃條件下，DNA產(chǎn)量、完整性以及RNA產(chǎn)量可以維持長達(dá)7年不發(fā)生明顯改變，但是RNA完整性在凍存5年后開始下降。因此建議保存組織時(shí)候進(jìn)行分裝，再加入RNA特異性穩(wěn)定劑后凍存于-80℃，更有利于組織內(nèi)RNA的保存。
關(guān)于蛋白質(zhì)的保存，目前也以深低溫凍存為主，可以很好地保護(hù)其穩(wěn)定性。短期儲(chǔ)存也可以保存在-20°C的低溫冰箱中。
3. 常溫保存：鑒于深低溫凍存的運(yùn)輸與操作的不便性，常溫保存的方法應(yīng)運(yùn)而生。常溫保存技術(shù)的原理可類比線蟲的脫水休眠現(xiàn)象，利用某些特殊技術(shù)或容器將脫水干燥后的樣本置于密閉環(huán)境中，或者向生物樣本中添加保護(hù)劑，使相關(guān)酶失活，從而達(dá)到常溫環(huán)境下保護(hù)樣本的目的。
樣本的運(yùn)輸條件01 全血/血漿/血清/干血片DNA: 24h內(nèi)可室溫運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，72h內(nèi)運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室置于2-8℃條件，72h及更長時(shí)間的運(yùn)輸需要在-20℃條件下。RNA：4h內(nèi)分離血漿，5天內(nèi)能夠運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室可保存在2-8℃，5天及更長時(shí)間運(yùn)輸時(shí)需在-20℃條件下。干血片可在室溫下運(yùn)輸。02 肺泡灌洗液24h內(nèi)可室溫運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室，72h內(nèi)需在2-8℃冷藏運(yùn)輸，72h及更長時(shí)間運(yùn)輸需采用-70℃或?yàn)楦鼑?yán)格的條件。03骨髓骨髓標(biāo)本應(yīng)在2-8℃條件下運(yùn)輸，如果用于RNA分析，應(yīng)該添加RNA穩(wěn)定劑。04 口頰細(xì)胞室溫條件下，核酸可穩(wěn)定存在1周，可室溫運(yùn)輸，檢測RNA，需放置在RNA穩(wěn)定劑中。05 淋巴細(xì)胞層從血液里分離的淋巴細(xì)胞，需在2-8℃冷藏運(yùn)輸，無法及時(shí)提取時(shí)應(yīng)放置-70℃以下儲(chǔ)存。06 腦脊液DNA病毒檢測: 需在2-8攝氏度條件下運(yùn)輸，應(yīng)該保存在-20℃或-70℃或者更低溫度條件下。RNA分析：立即置于冰上降溫，并置于干冰上運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室。07 細(xì)針抽取物 DNA病毒檢測: 需在2-8℃條件下運(yùn)輸，應(yīng)該保存在-20℃或-70℃或者更低溫度條件下。RNA分析：立即置于冰上降溫或置于RNA穩(wěn)定劑中進(jìn)行運(yùn)輸。08 組織DNA分析：新鮮組織應(yīng)該立即置于-20℃，并保持在冰上運(yùn)輸保存。RNA分析：新鮮組織采集后立即采用液氮速凍，進(jìn)行運(yùn)輸保存。石蠟包埋組織可室溫運(yùn)輸保存。09 痰液 30min內(nèi)可在室溫下運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室，否則應(yīng)在4-8℃條件下運(yùn)送010 糞便可借助糞便收集盒及糞便采集管進(jìn)行采集，黃豆粒大小樣本即可。4h內(nèi)進(jìn)行核酸提取或-80℃低溫保存。011 宮頸和尿道拭子在檢測試劑廠家推薦的運(yùn)送培養(yǎng)基中運(yùn)輸。012 植物組織樣本采集體態(tài)正常的新鮮樣本放入樣本袋中做好標(biāo)記；樣本若有泥土一般需要洗滌，之后對其進(jìn)行干燥并盡快進(jìn)行核酸提??；常溫或者-20℃進(jìn)行運(yùn)輸保存。 這里需要注意的是樣本儲(chǔ)存在穩(wěn)定的條件下，應(yīng)避免反復(fù)凍融。
蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司提供的實(shí)驗(yàn)室冰箱、超低溫冰箱，低溫存儲(chǔ)箱、液氮罐、-80冰箱廣泛應(yīng)用于生物樣本保存、生物試劑保存等。
